藥用輔料一般是指在生物制劑配方中包含的非活性成分，雖然是非活性成分，但藥用輔料往往具備賦形，成型，增溶，助溶等作用，甚至?xí)绊懰幮?，藥品質(zhì)量和安全性等方面。所以，藥用輔料在整個(gè)制藥過程一直受到各制藥企業(yè)的重視。藥用輔料同時(shí)需要達(dá)到較高的標(biāo)準(zhǔn)才可在生產(chǎn)中使用，如高純度，低內(nèi)毒素，符合多國藥典標(biāo)準(zhǔn)，以及ICH（International Conference on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use）特定標(biāo)準(zhǔn)等。

糖類輔料是藥用輔料中被廣泛使用的一類輔料，如海藻糖，蔗糖，半乳糖，甘露醇，甘露糖，麥芽糖，山梨醇等。蔗糖由于獨(dú)特的性質(zhì)，一直被用于蛋白的穩(wěn)定劑及細(xì)胞培養(yǎng)過程當(dāng)中。近年來，研究人員對海藻糖的研究逐漸增多，由于海藻糖的大規(guī)模生產(chǎn)和純化技術(shù)的發(fā)展以及海藻糖在熱穩(wěn)定性等方面都優(yōu)于蔗糖，海藻糖成為各制藥企業(yè)最常用到的用于穩(wěn)定蛋白的糖類輔料。對于糖類輔料在最終制劑配方中的使用大家已經(jīng)熟知，而近幾年對糖類輔料研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)這些常規(guī)的輔料在制藥的其他階段，如細(xì)胞培養(yǎng)，純化等階段，都有不同的應(yīng)用。本篇文章主要就是匯總一些近些年關(guān)于糖類輔料在生物制藥過程中的新應(yīng)用，希望可以給制藥公司研發(fā)人員提供一些新思路。

1.海藻糖在細(xì)胞保存中的應(yīng)用

細(xì)胞的低溫保存是生物制藥過程中重要的一個(gè)環(huán)節(jié)，細(xì)胞保存的好壞影響著復(fù)蘇后細(xì)胞的活性和狀態(tài)，最終將影響蛋白的產(chǎn)量。DMSO（二甲基亞砜）是科研及工業(yè)中常用的細(xì)胞凍存時(shí)使用的防凍劑，可以有效的防止冷凍過程中細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。但DMSO問題就是其具備較高的毒性，這不僅會對細(xì)胞造成一定影響，嚴(yán)重威脅著使用者的身體健康。好消息是，研究表明由于海藻糖的特殊性質(zhì)，海藻糖也可用于細(xì)胞凍存，而且效果不比使用DMSO差。一些大型先進(jìn)的制藥企業(yè)，已經(jīng)在內(nèi)部嘗試使用海藻糖代替DMSO進(jìn)行細(xì)胞凍存。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明，逐漸降低DMSO用量，增加海藻糖用量對細(xì)胞進(jìn)行凍存處理，在復(fù)蘇后，細(xì)胞狀態(tài)和活性與完全使用DMSO進(jìn)行凍存無任何差異。這些企業(yè)現(xiàn)在也正在積極嘗試摸索完全使用海藻糖代替DMSO進(jìn)行凍存的條件，相信這項(xiàng)技術(shù)會使使用者不再被DMSO這種毒性試劑所困擾。

2.海藻糖在細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用

在治療性抗體的生產(chǎn)過程中，經(jīng)常困擾著眾多企業(yè)的就是這些抗體的聚集現(xiàn)象。抗體蛋白的聚集可導(dǎo)致蛋白大小，可逆性，溶解度，結(jié)合能力，構(gòu)象的改變，這些結(jié)構(gòu)上的變化直接導(dǎo)致蛋白滴度及免疫性的降低。而且，這些結(jié)構(gòu)變化還會導(dǎo)致新的抗原表位出現(xiàn)，導(dǎo)致了不在預(yù)期之內(nèi)的免疫反應(yīng)的發(fā)生。最近一項(xiàng)研究表明，實(shí)驗(yàn)人員在CHO細(xì)胞培養(yǎng)過程中分別使用含海藻糖和不含海藻糖培養(yǎng)基去培養(yǎng)細(xì)胞，隨著培養(yǎng)時(shí)間的推移，在某一時(shí)間點(diǎn)，無海藻糖培養(yǎng)基中的活細(xì)胞密度急劇下降至接近0，而含海藻糖培養(yǎng)基中的活細(xì)胞密度始終保持穩(wěn)定。另一方面，含海藻糖培養(yǎng)基表達(dá)蛋白的濃度也是一直高于不含海藻糖培養(yǎng)基中的表達(dá)。同時(shí)，對這兩個(gè)不同培養(yǎng)基中表達(dá)蛋白mRNA進(jìn)行Real-time PCR的結(jié)果也是如此。這種現(xiàn)象是因?yàn)楹Ｔ逄窃诩?xì)胞生長過程中充當(dāng)一種具抗聚集作用的化學(xué)分子伴侶，同時(shí)海藻糖在這個(gè)過程中還可以穩(wěn)定細(xì)胞膜和蛋白，使細(xì)胞活性提高，進(jìn)而增加目的蛋白產(chǎn)量。因此，該研究為提高治療性抗體產(chǎn)品質(zhì)量提供了一個(gè)切實(shí)可行的方案。

3.海藻糖在純化過程中的應(yīng)用

海藻糖這種抗聚集的作用不僅可以應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)階段，同時(shí)還可應(yīng)用于純化階段。純化柱的制備是影響蛋白純化的核心，好的純化柱對可以保證最大程度去除雜質(zhì)，這樣可以保證最終藥物蛋白的藥效和安全性。然而，純化柱不是可以一直使用的，由于損耗，需要隨時(shí)更換新的純化柱。而海藻糖使得蛋白聚集現(xiàn)象大幅降低，這樣無形中延長了純化柱的使用壽命，使時(shí)間和成本大幅降低。大致估算海藻糖的應(yīng)用可以使純化柱壽命延長三分之一左右。

4.半乳糖在細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用

葡萄糖和谷氨酰胺一直作為細(xì)胞培養(yǎng)基中的主要碳源和能量來源，但由于培養(yǎng)基中葡萄糖和谷氨酰胺代謝速度過快，并且這個(gè)過程中大量積累乳酸和銨，抑制細(xì)胞功能，使得培養(yǎng)效率變得非常低。為了克服這一阻礙，研究人員嘗試使用半乳糖和谷氨酸鹽替換以上兩種成分。結(jié)果表明更換為半乳糖和谷氨酸鹽后，乳酸和銨的積累明顯降低，并且極大延長了培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)間，這種方法為細(xì)胞培養(yǎng)提供了一個(gè)更有效的方案。在實(shí)際應(yīng)用中，許多企業(yè)已經(jīng)在使用半乳糖來替換葡萄糖了。

Pfanstiehl Inc.于1919年在美國伊利諾伊州成立，一百多年的研發(fā)生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)使其成為專業(yè)化生產(chǎn)高品質(zhì)藥用糖類輔料的企業(yè)。Pfanstiehl代表產(chǎn)品有海藻糖，蔗糖，半乳糖等，產(chǎn)品具備高純度，低內(nèi)毒素，注射級藥用輔料，符合包括中國藥典在內(nèi)的多國藥典標(biāo)準(zhǔn)以及ICH Q3D金屬元素標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)，為了配合CFDA關(guān)于藥包材藥用輔料與藥品關(guān)聯(lián)審評政策，Pfanstiehl積極配合制藥企業(yè)進(jìn)行關(guān)聯(lián)審評，現(xiàn)階段Pfanstiehl海藻糖和蔗糖均提交了關(guān)聯(lián)審評材料，并且獲得海藻糖關(guān)聯(lián)審評受理號。

北京西美杰科技有限公司作為Pfanstiehl中國代理商已經(jīng)成為中國地區(qū)眾多生物制藥與疫苗企業(yè)的供應(yīng)商，同時(shí)，西美杰會繼續(xù)為中國客戶提供更多的產(chǎn)品與服務(wù)，讓企業(yè)在原輔料篩選，產(chǎn)品生產(chǎn)與質(zhì)檢，申報(bào)等工作中節(jié)省人力，資金，時(shí)間。